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    MDCK細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，推動(dòng)流感疫苗生產(chǎn)革新
    發(fā)布日期：2024.09.03

    流行性感冒作為一種常見的疾病，至今不能被有效控制。尤其是在流感季節(jié)，大量人群需要接種流感疫苗以預(yù)防病毒感染。

    目前流感疫苗生產(chǎn)的主要原材料是雞胚，將病毒接種在十日齡孵化過程中的雞胚尿囊腔里進(jìn)行病毒繁殖。在養(yǎng)殖行業(yè)高度產(chǎn)業(yè)化的今天，用雞胚來生產(chǎn)疫苗可以使成本壓到很低。但用雞胚生產(chǎn)最重要的問題是生產(chǎn)周期長，也無法應(yīng)對大流行（pandemic）的爆發(fā)。所以作為一種公衛(wèi)戰(zhàn)略，疫苗企業(yè)也在開發(fā)細(xì)胞基質(zhì)流感疫苗。其中，犬腎細(xì)胞MDCK以其培養(yǎng)容易、增殖快的特點(diǎn)，再加上α-2,6-和α-2,3-連接的唾液酸受體都暴露在MDCK細(xì)胞上[1]，并且它可以高效支持人和禽流感病毒的復(fù)制。因此，MDCK細(xì)胞成為適用于流感病毒疫苗生產(chǎn)的重要細(xì)胞系之一[2]。

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    采用生物反應(yīng)器大規(guī)模動(dòng)物細(xì)胞生產(chǎn)流感疫苗，是將病毒接種至種子細(xì)胞，并在生物反應(yīng)器上大規(guī)模進(jìn)行病毒繁殖以實(shí)現(xiàn)流感疫苗的規(guī)?；a(chǎn)。MDCK是上皮樣細(xì)胞，通常是以貼壁方式生長，近年也有懸浮馴化培養(yǎng)工藝見于報(bào)道[3-4]。貼壁培養(yǎng)的規(guī)?；囵B(yǎng)有幾種方式可以選擇，一種是從一種培養(yǎng)容器擴(kuò)大到更大規(guī)模的培養(yǎng)容器，如從培養(yǎng)瓶擴(kuò)大到細(xì)胞工廠，但這樣放大規(guī)模有限；另一種是利用微載體[5]或片狀載體[6]來提供超大的粘附面積，在反應(yīng)器中實(shí)現(xiàn)“半懸浮”培養(yǎng)。全懸浮培養(yǎng)是MDCK細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基中細(xì)胞在非貼壁狀態(tài)下懸浮培養(yǎng)。武漢賽科成提供各類生物反應(yīng)器及片狀載體，支持不同規(guī)模及工藝路線下疫苗的生產(chǎn)。

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    細(xì)胞基質(zhì)流感病毒滅活疫苗免疫原性和安全性方面均優(yōu)于雞胚基質(zhì)流感疫苗，對雞蛋過敏的人群也可以接種。因此，細(xì)胞基質(zhì)流感疫苗是未來流感疫苗的發(fā)展方向，也是有效應(yīng)對禽／人流感大暴發(fā)流行的最快捷、高效的疫苗生產(chǎn)方式。在未來，我們期待通過生物反應(yīng)器的廣泛應(yīng)用和培養(yǎng)體系的進(jìn)一步優(yōu)化，有望能實(shí)現(xiàn)更高密度、更大規(guī)模下的疫苗制備工藝，實(shí)現(xiàn)中國本土疫苗產(chǎn)業(yè)的革新氣象。

    參考文獻(xiàn)：

    [1] ki Y,Kawaoka Y.Enhanced expression of analpha2,6-linked sialic acid onMDCKcellsimproves isolation of human influenza viruses and evaluation of their sensitivity to a neuraminidase inhibitor[J].J Clin Microbiol, 2005,43(8): 4139-4146.

    [2]?Tree JA, Richardson C, Fooks AR, et al. Comparison of large-scale mammalian cell culture systems with egg culture for the production of influenza virus A vaccine strains. Vaccine, 2001, 19: 3444?3450.

    [3] 武毓姝,孫偉洋,趙夢琳,等. B型流感疫苗候選株在MDCK懸浮細(xì)胞上培養(yǎng)工藝優(yōu)化研究[J]. 病毒學(xué)報(bào),2024,40(2):283-292. DOI:10.13242/j.cnki.bingduxuebao.004464.

    [4] 李樂凱,吳業(yè)紅,徐軍,遲祥,李爽,席莉,張雪梅,郭占龍.生物反應(yīng)器高密度無血清培養(yǎng)全懸浮MDCK細(xì)胞和流感病毒工藝的建立[J].中國生物制品學(xué)雜志,2022,35(9):1082-1089.

    [5] 王石磊. (2012). 基于MDCK細(xì)胞培養(yǎng)的流感疫苗研究. (Doctoral dissertation, 上海交通大學(xué)).

    [6] 馬春英,王美皓. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)片狀載體的研究及應(yīng)用進(jìn)展[J]. 中國生物制品學(xué)雜志,2023,36(6):731-736,741.

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